称取磷酸二氢钾(KH2PO4)、磷酸氢二钠(Na2HPO4 12H2O)、氯化钠(NaCl)、氯化钾(KCl)和吐温-20,加水。
PBS:磷酸盐缓冲盐水
1 PBS配方pH7.4:磷酸二氢钾(KH2PO4): 0.27 g,
1.42克磷酸氢二钠(na2hpo4),
氯化钠(NaCl):8克,
0.2g氯化钾(KCl)、
加入约800mL去离子水,充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调节pH至7.4,最后定容至1L。
PH5.0磷酸盐缓冲液的制备
1.称取21.01克柠檬酸(C6H8O7。H2O)并将其溶解在1000毫升去离子水中。摇匀。
2.称取71.64g磷酸二氢钠(nah2po4.12h2o),溶于去离子水中,定容至1000ml,摇匀。
2.将243毫升第一步溶液与257毫升第二步溶液混合。摇匀。放在4度的冰箱里保存就好了。
Pbs制备方法
含0.05%吐温-20的pH7.2-7.4的磷酸盐缓冲液(简称PBS-T)的制备方法如下:
称取磷酸二氢钾(KH2PO4)、磷酸氢二钠(Na2HPO4 12H2O)、氯化钠(NaCl)、氯化钾(KCl)和吐温-20,加水。
1l PBS配方:
氯化钠(NaCl),8克
氯化钾(KCl),0.2克
1.44克磷酸氢二钠(Na2HPO4)
0.24克磷酸二氢钾(KH2PO4)
调节ph至7.2,定容1L。
然后高压灭菌并储存在室温下。
通常,PBS缓冲液用作溶解保护试剂的溶剂。试剂具体比例一般不一样,所以靶向效果更好。
10X PBS是0.1M PBS储备溶液。
0.1M PBS溶液,以1L量为例:
80克氯化钠
磷酸氢二钠12H2O 32.3g克
NaH2PO4 2H2O 4.5g
(最常见的十二水合磷酸氢二钠和二水合磷酸氢二钠吸收的水分不多,
如果你有这两种非水磷酸盐,你可以转换它们。没有水很容易吸水。)
加入约900mL双蒸水,用HCl/NaOH调节pH至7.4,最后定容至1000mL。
称取0.2M Na2HPO4: 71.6g Na2HPO4-12H2O溶于1000ml水中。不同浓度PB(pH=7.4)的配制:首先,配制0.2M PB (pH=7.4,100ml):
然后按相应比例稀释0.2M PB (pH=7.4),例如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2 MPB,用水稀释至1000ml。0.01M PB (PH=7.4):取50毫升0.2mpb,用水稀释至1000毫升。0.05M PB (PH=7.4):取250ml 0.2 MPB,用水稀释至1000ml。
PBS作为生物实验中最常用的试剂,相信很多小伙伴都配置或使用过。PBS是磷酸盐缓冲盐溶液(pho
第一步:准备好清洗干净的瓶子和配置PBS所需的纯水。
第二步是根据所需的PBS浓度确定每种成分的所需量。不同的实验室有不同的要求,所以成分和用量会有所不同。以我们细胞部门为例,我们配置的PBS组件如下:
试剂名称g/lk H2 po 40.144 NAC 9.0 na 2 hpo 40.421
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第三步,将称好的药物加入纯水中,搅拌至完全溶解。
第四步,调节溶液的pH值至7.4左右。这里不同的实验对溶液的pH值有不同的要求。细胞部分主要被胰蛋白酶消化,碱性环境下胰蛋白酶的活性会更强,所以细胞部分的pH值可以略高。如果用于一般实验,可以调节到pH 7.2-7.4。
第五,将配制好的溶液定容至所需体积,然后高温高压灭菌或用0.22um滤膜灭菌。如果有足够的时间,可以高温高压灭菌。如果着急的话,可以直接用0.22um的滤膜过滤,效果是一样的。
第六步:当无菌PBS的温度降低或过滤后,即为无菌PBS。拧紧瓶盖,封好密封膜,放入4度冰箱备用。
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PBS是我们实验中非常常用的试剂。虽然配置比较简单,但是需要用心去做。毕竟做好每一步是得到一个漂亮实验结果的前提。
含0.05%吐温-20(简称PBS-T)的pH7.4磷酸盐缓冲液的制备方法如下:称取磷酸二氢钾(KH2PO4)、磷酸氢二钠(Na2HPO4 12H2O)、氯化钠(NaCl)、氯化钾(KCl)、吐温-20,加水,Pbs:磷酸盐缓冲盐水PBS 1l配方pH7.4:磷酸二氢钾(KH2PO4)、磷酸氢二钠(Na2HPO4)、氯化钠(NaCl)、氯化钾(KCl)和水。通常,PBS缓冲液用作溶解保护试剂的溶剂。试剂具体比例一般不一样,所以靶向效果更好。
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