一些基因文库在包含的基因数量、构建方法和基因结构的完整性方面不同于基因组文库。有些基因文库含有少量基因,基因结构中缺少非编码区,编码区有内含子。
对于真核生物,cDNA文库中获得的基因缺少内含子和非编码区。CDNA是通过将DNA转录成RNA,然后反转录得到的。在转录过程中,原始DNA的内含子和非编码区将被切除,只留下对应于原始DNA编码区外显子的RNA片段。如果进行逆转录,得到的cDNA会和原来的DNA不一样。因此,仅仅提供基因组测序的cDNA文库是不够的。
真核基因一般通过合成的方法获得,而原核基因可以通过限制性内切酶直接从DNA上切割下来。因为原核生物的基因是连续的,不间断的,直接切割就可以得到目的基因。然而,真核细胞的基因是间断和不连续的,并且含有不表达的内含子。
(cDNA文库)通过逆转录从某种生物基因组转录的所有mRNA产生的cDNA片段分别与克隆载体重组,并储存在某种受体细菌中。如果通过分子杂交或抗体筛选目的基因,可用噬菌体载体构建cDNA文库。
噬菌体载体-λZap cDNA载体?λZapcDNA载体通常在插入点上游有一个强启动子,最初启动目的基因的表达。与原始基因无关。
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