今天给大家分享一下细胞破碎(细胞破碎仪)的问题。以下是边肖对这个问题的总结。让我们来看看。
首先,细胞破碎的方法
二、细胞破碎的方法有哪些
(1)酸碱处理:调节pH值,改变蛋白质的荷电性质,提高产物的溶解度。 (2)化学试剂处理:用表面活性剂或有机溶剂(甲苯)处理细胞,增大细胞壁的通透性,降低胞内产物的相互作用,使之容易释放。 (3)酶溶:利用溶解细胞壁的酶处理菌体细胞,使细胞壁受到部分或完全破坏后,再利用渗透压冲击等方法破坏细胞膜,进一步增大胞内产物的通透性。 酶溶的优点:操作温和,选择性强,酶能快速地破坏细胞壁,而不影响细胞内含物的质量,但缺点是酶的费用高,因而限制了它在大规模生产中的应用。 化学渗透法与机械破碎法相比:速度低,效率差,且化学或生化试剂的添加形成新的污染,给进一步的分离纯化增添麻烦。但化学渗透法选择性高,胞内产物的总释放率低,可有效抑制核酸的释放,料液粘度小,有利于后处理。
第三,想了解细胞破碎的方法以及各种方法的原理和优缺点。
机械法:主要通过机械剪切力的作用破碎组织细胞的方法。常用的器械有组织捣碎器、匀浆器、研钵、研磨机、压力机等。
常用的细胞破碎方法包括反复冻融、超声波破碎、酶处理、自溶和表面活性剂处理。
细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤。破碎方法是否合适,直接影响提取产品的产量、质量和生产成本。实验室中破碎组织细胞的方法有很多,包括机械方法、物理方法、化学方法和生物化学方法。
扩展数据:
细胞破碎条件
在粉碎前,材料往往需要预处理,如去除与实验无关的结缔组织、脂肪组织和血渍的动物材料,要去壳的植物种子,从发酵液成分中分离细菌的微生物材料。
对于同一种实验材料,由于实验要求不同,在断裂方法上也有一些差异,比如提取核酸和提取核苷酸,前者必须保持非常温和的条件,以保持分子的完整性;后者可以使用强有力的手段。
不同的实验规模,不同的实验材料和要求,有不同的粉碎方法和条件。一些坚韧的组织,如肌肉和植物的根,往往需要强烈的搅拌或研磨才能破坏其组织和细胞。肝脏、大脑等软组织,普通玻璃均质机可以完全破坏。
四、实验室常用的细胞破碎方法有哪些?
一般用物理或者化学方法来使得细胞裂解
物理法:
(1)反复冻融:将细胞反复放置于-20℃冷冻以及25-30℃环境下,反复冷冻溶解10次-20次。适用于例如血细胞等大部分哺乳动物细胞。
(2)煮沸法:与冻融法相反,将细胞放置于100℃沸水煮沸5-10分钟,适用于大部分微生物细胞。
(3)超声法:将细胞放置于超声破碎仪中,以一定频率的超声破碎细胞,适用于绝大部分微生物细胞。
(4)渗透压法:将血细胞等细胞膜较为薄弱的细胞放置于纯水等低渗溶液,细胞吸收大量水分破解。
(5)液氮法:植物细胞一般采用液氮捻磨的方法破解细胞。
化学法:
(1)强酸、强碱溶液:一般应用0.5N NaOH溶液可以裂解绝大部分动物细胞和微生物细胞。
(2)生物酶:一般用溶菌酶、蛋白酶K等酶裂解微生物细胞。
以上是边肖对细胞破碎剂及相关问题的回答。希望细胞破壁机的问题对你有用!
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