培养基的配制（培养基的配制原则）

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培养基制备操作技术

计算:根据培养基配方比例，计算各组分用量；称重:精确称量各种成分；融化:将所有配料加入烧杯中，用玻璃棒加热搅拌溶解，加入琼脂使其融化，加水至一定量；调节ph值。

过滤:用滤纸或棉花过滤。

分装:一般培养基在三角瓶中或试管中灭菌。

干粉培养基的制备

1.准备干粉培养基，三角瓶，药勺，无菌托盘，油性笔。首先，在瓶子上标注培养基的信息。

2.把三角瓶放在电子秤上，调零。根据所需剂量，用药勺将干粉培养基加入三角瓶中。

3.称重后，及时盖上培养基瓶盖并拧紧。用量筒量取适量蒸馏水或去离子水。

4.用少量水湿润干粉，避免灰尘。加入剩余的水。摇匀。

5.将培养基加热煮沸三次，溶液应清澈明亮，无明显琼脂颗粒挂壁和分层。

6.插上透气硅胶塞，用牛皮纸或报纸包好。在高压灭菌器中灭菌。

7.暂时不用的培养基可以在50℃的烘箱或水浴中保温。倒平板时，准备无菌平板、记号笔等。在干净的工作台或生物安全柜中。

8.打开包装后，将无菌培养皿倒置，在底部边缘写下关于该培养皿的信息。

9.将贴有标签的无菌平板倒置，当培养基温度降至50℃左右时，倒掉培养基。

10.倒完后，轻轻摇动盘子三次，使盘子边缘整齐。铺料可以加速琼脂的冷却和凝固。

11.使用前，将平板倒置在无菌实验室的烤箱中，在55℃下放置15分钟。擦干平板表面的水分。

md培养基的优化制备

基础葡萄糖培养基(MD培养基)是一种基础葡萄糖培养基，属于营养缺陷型培养基，用于酿酒酵母EBY100菌株的培养和感受态细胞的制备。

配方和制备* * *

部件g/L

酵母碱性氮源13.4

葡萄糖20.0

亮氨酸0.1

纯化琼脂或琼脂糖15.0

准备* * *:

1.用1000 ml蒸馏水重新悬浮41.8g MD培养基，加热并搅拌，直至其完全溶解。

2.121℃灭菌20min。

3.当冷却至55-60℃时，加入10 ml过滤灭菌的10 mg/mL色氨酸溶液，倒平板。(注:在筛选pYD1载体的转化体时，没有加入色氨酸。)

铸板可在4℃保存2个月。

如何配制淀粉培养基

淀粉培养基是由牛肉酱、蛋白胨、氯化钠、可溶性淀粉、水和琼脂制成的实验容器。

淀粉培养基制备如下:

将18 ~ 24小时的纯培养物接种在淀粉琼脂平板上(一个平板可接种不同区域)或直接移植到淀粉肉汤中。

在36±1℃培养24 ~ 48h，或在20℃培养5天。

然后将碘试剂直接浸入培养表面。如果是液体培养，在试管中加入几滴碘试剂。

马上查结果，阳性反应(淀粉分解)是琼脂培养基呈深蓝色，菌落或培养物周围出现无色透明圈，或肉汤颜色不变。

阴性反应无透明圈或肉汤呈深蓝色。

液体培养基的制备

常用的，如沙氏培养基，只要培养基中不加琼脂，就需要液体。

成分(克/升)

蛋白胨10.0克

葡萄糖40.0克

加热溶解于1000ml蒸馏水中，在115℃高压灭菌20分钟。

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