双缩脲试剂检测蛋白质原理

今天给大家分享一个关于双缩脲试剂检测蛋白质原理的问题。以下是边肖对这个问题的总结。让我们来看看。

1。双缩脲试剂检测的蛋白质原理是什么？

由于蛋白质中含有许多与缩二脲结构相似的肽键，缩二脲试剂在碱性溶液中能与蛋白质反应生成紫色络合物。因此，蛋白质检测的实验原理是缩二脲试剂与紫色的蛋白质发生反应。

用于检测缩二脲时，蛋白质分子中含有许多类似缩二脲的肽键，因此在碱性溶液中也能与铜离子生成缩二脲试验。当底物含有肽键时，试液中的铜与多肽配位，络合物呈紫色。浓度可通过比色法分析，紫外-可见光谱中的波长为540nm。识别反应的灵敏度为5-160毫克/毫升。

双缩脲试剂检测的蛋白质评价:

优点:双缩脲法测定蛋白质的范围为1~10mg蛋白质，操作简单快速。它既适合手工操作，也适合自动分析，具有良好的重复性和线性关系。缩二脲试剂可以长期保存(如果保存瓶中出现黑色沉淀，则需要重新配制)。

缺点:灵敏度差，测量范围窄，样品要求大，不同蛋白质产生的颜色深浅相似，所以常用于快速但不是很准确的蛋白质测定。干扰测定的物质包括性质为氨基酸或肽类的缓冲液，如TrIs缓冲液，因为它们产生阳性显色反应，铜离子也容易被还原，有时会出现红色沉淀。

二、双缩脲试剂鉴别蛋白质的原理？！

蛋白质的肽键类似于缩二脲，在碱性环境下能与铜离子形成紫色络合物(缩二脲试剂)。稀氢氧化铜溶液(费林试剂)氧化性弱，能与还原糖中的醛基反应生成砖红色氧化亚铜沉淀。

缩二脲试剂是一种用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。它是一种碱性含铜试液，呈蓝色，由0.1克/毫升氢氧化钠或氢氧化钾、0.01克/毫升硫酸铜和酒石酸钾钠组成。

扩展数据

双缩脲试验主要涉及肽键，所以受蛋白质特异性影响较小。而且所用试剂廉价易得，操作简便；可检测范围为1-10 mg蛋白质，适用于精度要求不高的蛋白质含量测定，可检测的蛋白质含量必须在0.5mg左右以上，浓度可用比色法分析，紫外-可见光谱中的波长为540nm。

双缩脲法存在准确度低、样本量大的缺点。干扰这种测定的物质包括性质为氨基酸或肽的缓冲液，如TrIs缓冲液，因为它们产生阳性显色反应，铜离子也容易被还原，有时会出现红色沉淀。

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